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动物与组织学技术

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论坛首页  >  实验动物与组织学技术讨论版   >  【动物实验】
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【求助】大鼠心脏移植模型的建立过程中遇到的相关问题

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楼主 winner5028
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这个帖子发布于3年零327天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人正在建立大鼠心脏移植模型，目前刚刚做到第十对，先说一下自己的方法。麻醉：异氟烷加氧气麻醉，比较稳定，150秒左右诱导完毕，手术过程中也是异氟烷气体麻醉，量比诱导时少1/3，供体250-300g，腹部十字开口，游离部分下腔静脉及腹主动脉，由下腔静脉注入50u/ml的肝素水2ml，全身肝素化，2min后由下腔静脉注入0-4℃ 25u/ml的肝素水20ml，同时剪断腹主动脉放血。灌注后U形开胸，胸腔放置冰屑快速停跳。如观察到灌注不好可在肝上下腔补灌一次。剪除胸腺，结扎上腔静脉及下腔静脉，集束结扎肺静脉，分离升主动脉至无名动脉，在无名动脉下方剪开。游离肺动脉，剪开，贴近气管取出心脏。
修剪：0-4℃肝素水中保存心脏，修剪主动脉及肺动脉，于左右肺动脉分叉处剪开，并分离主动脉及肺动脉间的结缔组织。 挤出心腔内残血。
受体：麻醉同前，腹部白线纵行开口，自制拉钩牵开腹壁，将肠道拨至大鼠左侧，分离大鼠右肾静脉至右侧腰静脉水平，结扎左侧腰静脉，结扎下腔静脉至背部属支。0.5-1ml肝素水阴茎背静脉注射，1min后以无创血管夹阻断腹主动脉及下腔静脉，先夹远心端后夹闭近心端。静脉开纵行口，口径大致与肺动脉匹配，显微镜下吻合（前9对裸眼下缝合的，经常缝错，还又一次把下腔静脉前后壁缝到一起了，第十对用的显微镜缝合，看的很清楚），动脉以针提起，剪弧形口，与腹主动脉吻合，接近完成后注入肝素水，冲出气泡。先开放远心端，出血不多再开放近心端，动脉出血可以补针。开放后可见心脏逐渐变红润，开始搏动，但都搏动30s-1min后就不怎跳了，逐渐表现出有些暗红色，（充血？流出道问题？有几次只能看见右心室跳动，左心室不跳动）。
目前存在的问题：
1.心脏复跳不好，或者复跳后又停跳，或者右心室跳左心室不跳。表现为暗红色，充血？流出道狭窄？吻合口血栓？
2.大鼠复苏后下肢瘫痪，或者本来刚苏醒时下肢还能动，一天后就不能动了。
3.大鼠目前都只能存活1天左右，最长36小时左右。
请各位战友帮忙找找问题，介绍一下经验
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2015-12-24 11:05 浏览 : 2698 回复 : 27
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原位还是异位？
2015-12-25 11:36
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楼主 winner5028
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异位腹腔心脏移植，供体的肺动脉与受体的下腔静脉，供体的升主动脉与受体的腹主动脉都是端侧吻合。
2015-12-25 15:49
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楼主 winner5028
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昨晚上做的第十一对，供体用的废鼠（体重400g，雌的），供体用的SD大鼠280g，供体用的气体麻醉诱导，水合氯醛腹腔注射，受体用的全程气体吸入麻醉。肺动脉后壁与下腔静脉吻合用的显微镜，因为不方便，后边都裸眼吻合的，吻合完了开放，心脏跳动非常好，出血不也不多。关腹后5分钟就苏醒了，活动良好，没有下肢瘫痪，皮下注射补了2ml糖盐。结果今天早晨去观察又死了，剪开看肚子里都是黑血，估计是吻合口出血了。
今天上午做的第十二对，供受体都是SD大鼠，供280g，受260g，都是吸入麻醉。取心脏用了30min，修剪用了7min，受体到开放血管用了80min，开放以后动脉出血补了一针，后来观察到肺静脉漏点血，估计是集束结扎肺静脉的时候没结扎紧，又重新带线结扎。观察15min，出血不明显，关腹。10min苏醒，醒了呆了一会儿就很欢实了，也没发现双下肢瘫痪，保温10min后放回笼子单独饲养。下午准备给老鼠的水瓶换成糖盐。期待明天早晨去看它的时候它还活着。
2015-12-25 15:57
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