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【求助】大鼠心脏移植模型的建立过程中遇到的相关问题

急诊科医师 · 最后编辑于 2022-10-09 · IP 北京北京
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这个帖子发布于 9 年零 206 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人正在建立大鼠心脏移植模型,目前刚刚做到第十对,先说一下自己的方法。麻醉:异氟烷加氧气麻醉,比较稳定,150秒左右诱导完毕,手术过程中也是异氟烷气体麻醉,量比诱导时少1/3,供体250-300g,腹部十字开口,游离部分下腔静脉及腹主动脉,由下腔静脉注入50u/ml的肝素水2ml,全身肝素化,2min后由下腔静脉注入0-4℃ 25u/ml的肝素水20ml,同时剪断腹主动脉放血。灌注后U形开胸,胸腔放置冰屑快速停跳。如观察到灌注不好可在肝上下腔补灌一次。剪除胸腺,结扎上腔静脉及下腔静脉,集束结扎肺静脉,分离升主动脉至无名动脉,在无名动脉下方剪开。游离肺动脉,剪开,贴近气管取出心脏。
修剪:0-4℃肝素水中保存心脏,修剪主动脉及肺动脉,于左右肺动脉分叉处剪开,并分离主动脉及肺动脉间的结缔组织。 挤出心腔内残血。
受体:麻醉同前,腹部白线纵行开口,自制拉钩牵开腹壁,将肠道拨至大鼠左侧,分离大鼠右肾静脉至右侧腰静脉水平,结扎左侧腰静脉,结扎下腔静脉至背部属支。0.5-1ml肝素水阴茎背静脉注射,1min后以无创血管夹阻断腹主动脉及下腔静脉,先夹远心端后夹闭近心端。静脉开纵行口,口径大致与肺动脉匹配,显微镜下吻合(前9对裸眼下缝合的,经常缝错,还又一次把下腔静脉前后壁缝到一起了,第十对用的显微镜缝合,看的很清楚),动脉以针提起,剪弧形口,与腹主动脉吻合,接近完成后注入肝素水,冲出气泡。先开放远心端,出血不多再开放近心端,动脉出血可以补针。开放后可见心脏逐渐变红润,开始搏动,但都搏动30s-1min后就不怎跳了,逐渐表现出有些暗红色,(充血?流出道问题?有几次只能看见右心室跳动,左心室不跳动)。
目前存在的问题:
1.心脏复跳不好,或者复跳后又停跳,或者右心室跳左心室不跳。表现为暗红色,充血?流出道狭窄?吻合口血栓?
2.大鼠复苏后下肢瘫痪,或者本来刚苏醒时下肢还能动,一天后就不能动了。
3.大鼠目前都只能存活1天左右,最长36小时左右。
请各位战友帮忙找找问题,介绍一下经验






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