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大肠杆菌诱导表达后菌体不能超声破碎

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楼主

常驻站友

1楼

这个帖子发布于13年零330天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

本人在做一系列蛋白的表达,非常郁闷的是有两个蛋白表达菌株经IPTG诱导后收集菌体进行超声破碎却非常困难.其他的蛋白表达菌体都非常容易破碎,效果也很好.实验中用的表达载体是pET28a,SDS-PAGE检测蛋白表达的很好.所以特求高手赐教,这问题很令我头疼啊! 谢谢大家

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2007-01-07 20:14 浏览 : 4082 回复 : 11

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• 全科医生转岗培训

清风逐梦00

铁杆站友

2楼

可以用溶菌酶室温先作用，再进行超声，

2007-01-08 10:51

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• 耗材再次砍，骨科，心内，普外等集体采购！

20021108

丁香园荣誉超版

3楼

请修改标题格式，谢谢~~~

2007-01-08 10:54

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• 【交流】毕业前发几篇SCI文章才保险？你们学校的毕业要求坑爹吗？

ding_chen

铁杆站友

4楼

裂解细菌的方法很多,超声破碎应该是很不完全的。我们是先在-80度反复冻融3-4次,再加溶菌酶处理半小时(注意PH值7,9-8,0)。再去超声。你也可换个菌株BL21(DE3)plays ,里面表达蛋白同时表达了溶菌酶,只要冻融几次细菌就裂解的非常充分了。

2007-01-08 14:14

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• 这一波操作，行云流水（文末有福利）

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