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蛋白质和糖学
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蛋白质和糖学技术讨论版
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蛋白表达纯化
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大肠杆菌诱导表达后菌体不能超声破碎
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楼主
lyping
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丁当
1楼
这个帖子发布于
12年零339天
前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人在做一系列蛋白的表达,非常郁闷的是有两个蛋白表达菌株经IPTG诱导后收集菌体进行超声破碎却非常困难.其他的蛋白表达菌体都非常容易破碎,效果也很好.实验中用的表达载体是pET28a,SDS-PAGE检测蛋白表达的很好.所以特求高手赐教,这问题很令我头疼啊! 谢谢大家
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2007-01-07 20:14
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丁香早知道 - 12.6 | 没考研的“差生”同学年薪百万，而我还为生存挣扎
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2楼
可以用溶菌酶室温先作用，再进行超声，
2007-01-08 10:51
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丁香晚间病例-拍胸片发现病人没有心脏？等弄明白原因也还是惊了
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丁当
3楼
请修改标题格式，谢谢~~~
2007-01-08 10:54
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国家卫生健康委办公厅关于印发空气污染（霾）人群健康防护指南的通知
ding_chen
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丁当
4楼
裂解细菌的方法很多,超声破碎应该是很不完全 的。我们是先在-80度反复冻融3-4次,再加溶菌酶处理半小时(注意PH值7,9-8,0)。再 去超声。你也可换个菌株BL21(DE3)plays ,里面表达蛋白同时表达了溶菌酶,只要冻融几次细菌就裂解的非常充分了。
2007-01-08 14:14
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