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神经生物

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论坛首页  >  神经生物学讨论版   >  细胞培养
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【求助】PC12细胞类型的选择及培养方案的一点设想

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2011大爱无疆
养得真漂亮,高倍镜的瞧瞧!
死细胞还是有点多的,凑合看看啊.不知道这两张够不够你的要求。



2012-02-27 18:04
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我现在养的PC12未分化的,细胞形态不稳定,还有一些很大的细胞,得用NGF诱导后造模,时间漫长,你们造模H2O2的浓度多少呀,我一直没造出来,文献中都在200-600umol/L之间,我觉得这个浓度太低,配药都很难配呀,麻烦问一下,上面的楼主怎么配H2O2的?谢谢
2012-05-26 22:29
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signalpathway
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非常感谢楼主建立这个贴供大家讨论。
本人计划养PC12细胞,现在还是一头雾水。
首先,关于做神经损伤的保护作用,如何选PC12细胞分化型的问题,本人系统检索了PUBMED数据库,发现使用高分化细胞的绝大多数论文是亚洲,尤其是中国学者,发表期刊的影响因子也相对较较低。在检索的几篇高因子论文(Nature, PNAS等)中,用的细胞都需要先用NGF诱导分化后,才进行相关实验的。因此,可以推测国内目前使用的大多数PC12细胞均为高分化的,且其可接受度在欧美学界尚存在着不确定性。那么进一步分析,欧美学者用的是什么细胞呢,我想肯定不是高分化的。目前ATCC库中PC12细胞只有两个货号,一个是CRL-1721(用1640养),另一个是CRL-1721.1(Adherent型,用F12养),均表明可用NGF诱导出神经表型,但均未说明到底是低分化或未分化的。ATCC提供的照片我也附在下面,请养过PC12的同志们鉴定一下,对应中科院细胞库应该是哪种细胞。
其次,有关中科院细胞库的三种分化型PC12细胞,很头痛。三种分化之前的区别,尤其是低分化与未分化细胞之间应该选哪个,也没有搞明白。中科院细胞库位于中科院上海分院的神经所里。是不是他们哪个课题组把从ATCC买来的细胞进行某种处理后形成的?


2013-07-25 16:00
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楼主 2011大爱无疆
2011大爱无疆
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signalpathway
非常感谢楼主建立这个贴供大家讨论。
本人计划养PC12细胞,现在还是一头雾水。
首先,关于做神经损伤的保护作用,如何选PC12细胞分化型的问题,本人系统检索了PUBMED数据库,发现使用高分化细胞的绝大多数论文是亚洲,尤其是中国学者,发表期刊的影响因子也相对较较低。在检索的几篇高因子论文(Nature, PNAS等)中,用的细胞都需要先用NGF诱导分化后,才进行相关实验的。因此,可以推测国内目前使用的大多数PC12细胞均为高分化的,且其可接受度在欧美学界尚存在着不确定性。那么进一步分析,欧美学者用的是什么细胞呢,我想肯定不是高分化的。目前ATCC库中PC12细胞只有两个货号,一个是CRL-1721(用1640养),另一个是CRL-1721.1(Adherent型,用F12养),均表明可用NGF诱导出神经表型,但均未说明到底是低分化或未分化的。ATCC提供的照片我也附在下面,请养过PC12的同志们鉴定一下,对应中科院细胞库应该是哪种细胞。
其次,有关中科院细胞库的三种分化型PC12细胞,很头痛。三种分化之前的区别,尤其是低分化与未分化细胞之间应该选哪个,也没有搞明白。中科院细胞库位于中科院上海分院的神经所里。是不是他们哪个课题组把从ATCC买来的细胞进行某种处理后形成的?



signalpathway功底非常深厚,至于中科院如何生产出高分化的PC12细胞,有何作用,是否被国际上认可?目前都是一个谜。做实验前认识到这样的问题,是一个不错的开端。

顺便请signalpathway提供有关使用高分化PC12细胞作为研究对象的文献,大家一起学习。
2013-07-26 21:54
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