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【进展与热点】我的第一株百日咳鲍特菌

发布于 2012-03-04 · IP 陕西陕西
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这个帖子发布于 13 年零 244 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
今天真是一个令人兴奋的日子
自从开始百日咳的实验以来,迄今培养了30份的鼻咽拭子。通过PCR倒也确证了约10例的百日咳感染。
可一直没有对百日咳鲍特菌分离成功。
今天,2012年3月4日,早晨来到实验室,打开我得孵育箱,拿起那几块平皿,走到生物安全柜下一个个的看,原本以为那个27号比较可疑,因为它也是长了48h后才隐约看到有菌落,昨天对它染色后,竟然是G阴性的丝状长杆菌。
而今天不一样了,打开那个30号标本,呀!!!!!有可疑的菌落,小的光滑的半透明的灰白色菌落,就在一区,有许多像蚕卵一般的密密麻麻,因为之前我已经通过另外一个鼻咽拭子的PCR检测过,是阳性的。
当时我就觉得有戏,因为那是我2月29号接种的平皿,今天是第四天!从菌落形态和生长时间来看非常吻合!
做触酶:阳性。
氧化酶:似乎是阴性——不过我知道可能是菌落太小的原因,我也挑的少。
染色镜检:没问题,G阴性小的杆菌或偶见球杆菌。
就这样,回头再翻书!我太兴奋了!也就氧化酶可能是刚提及的原因不符合!

别的不想了了,先把它赶快转种另外一块碳琼脂以及巧克力琼脂再说,那样我就有大量的菌可以保存了!

我还是兴奋,当即决定刮点菌落做PCR,bp引物加入扩增,然后回家吃饭!
下午跑胶,第一份就是它,没错,非常亮的条带,另外3份标本也有一个阳性,加上阳性对照,3条带都不错,clone
的更亮些,位置似乎比对照和另外一份阳性标本更低几个bp的样子。
这样就99%的可以肯定它就是我要的百日咳鲍特菌了。
一鼓作气,把bptox也给它扩了,然后去剪头发……
回来跑胶,结果依然同bp扩增的结果相似。更亮更低……

后天,转的应该就会长出来!我要好号好保存它!
因为,我终于培养出了百日咳鲍特菌这个临床分离率非常低的苛养菌!

希望我以后的标本可以多分离几个……明天照相上传!























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