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细胞技术

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心肌细胞原代讨论

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楼主 冷月寒星
冷月寒星
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这个帖子发布于16年零149天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近在进行心肌细胞原代培养,但是对于心肌细胞培养还有很多问题。

希望各位战友指导,
心肌细胞的纯化,我现在用的只是在原代培养时,用差速贴壁去除成纤维细胞,(2-3h),但是我觉得效果不是很理想,10几天后,又有成纤维细胞长出。
我该如何做,才能更好的得到纯化的心肌呢?
我不想因为加入干扰太大的药物,对实验造成影响。

心肌细胞原代,最长能活几周?有高手养锝心肌细胞,一个月后还会跳,极限是多长时间?
心肌细胞真能长满一层,而且都能搏动么?有见过的么?我养的几瓶心肌细胞,才那么几个会搏动的。(用的高糖DMEM)
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2003-07-16 22:15 浏览 : 2818 回复 : 6
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楼主 冷月寒星
冷月寒星
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  • 3楼
uhouuhou
DMEM抑制成纤维细胞的生长,我是在2小时后倒瓶去除心肌细胞的效果还可以。另外不是说一个成纤维细胞没有就最好,有一些也没关系吗
我所知道的乳鼠心肌细胞传2-3代还是可以的。心肌细胞可以长满一层,但不是都搏动,我想也不是同时搏动。一个视野恐怕只有几个。
祝好运!!


DMEM是如何抑制成纤维细胞生长的?
心肌细胞真的可以传2-3代?
你亲手做过么,如果是就太好了。我的心肌为什么长不了一瓶,而且好像半瓶半瓶长,不知为什么。我是几个视野才有搏动的心肌细胞。
而且是成团的容易有搏动,单个收缩的少。
书上说,心肌细胞体外培养是成纤维细胞型的,那怎么与成纤维细胞区分呢?形象一点说,我培养的心肌细胞单个的有些像树根。是否成纤维细胞的形态更像树枝形呢?就是星形突起更细更多呢?
用无血清DMEM进行同步化后,心肌细胞的形态会发生什么变化?细胞变细是正常的么?同步化后,我真的分不清哪些是心肌细胞了
请高手指点
2003-07-17 16:59
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楼主 冷月寒星
冷月寒星
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今天细胞又污染了,由于应用新生乳鼠取材,可能取心肌时损伤食道,造成污染,看来在培养基内加入双抗还是必要的
2003-07-19 19:58
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菊花与刀
菊花与刀
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colinbai
今天细胞又污染了,由于应用新生乳鼠取材,可能取心肌时损伤食道,造成污染,看来在培养基内加入双抗还是必要的
不会吧,新生乳鼠取心肌时会损伤食道?我觉得取材时,你只要将胸廓剪开,用眼科剪将心尖部剪下来后就可以了,一般不会损伤食道。
另外为了避免成纤维细胞,可以加入100umol/L的BrdU,能够抑制成纤维细胞增殖。
2003-07-20 16:39
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