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蛋白质和糖学
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蛋白质和糖学技术讨论版
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蛋白表达纯化
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【求助】如何减少透析过程中蛋白的析出（除去咪唑）
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楼主
wangmingcui
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丁当
1楼
这个帖子发布于
11年零82天
前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家好，想问个问题，当我的蛋白（等电点为10）用Elution buffer （250mM咪唑PH8）洗脱下来后，为了除去咪唑，我将蛋白放入透析袋中透析过夜，透析液曾经选用过灭菌蒸馏水、PBS（PH 7.4）为什么我的蛋白仍然大量析出呢？
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2008-09-17 13:13
浏览 : 4004
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丁当
2楼
袋子破了，换个新的3K透析袋。
2008-09-17 13:26
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2020年在职医学博士信息交流
panmo2006
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丁当
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3楼
有些蛋白对溶液环境变化（尤其是pH）的敏感性可能比我们想象的要高的多，蛋白的理论等电点并不是用来防止蛋白析出时透析溶液PH值的唯一指标，所以可以考虑将pH值调回8。我以前就是使用前后不通缓冲液来透析，造成蛋白成絮状沉淀，但在后面我只是调整了溶液的pH值同开始的溶液pH相同后，蛋白透析正常。
2008-09-17 14:32
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丁香晚间病例-就扇了一耳光，患者就脑死亡了……
wlnju
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丁当
4楼
同意ls
或者可以梯度透析，不要蛋白洗脱液直接泡进PBS，用梯度咪唑透析
或者上脱盐柱也行啊。
2008-09-17 15:29
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丁香晚间病例-女孩脾脏长满密密麻麻的虫卵，医生切开也惊了
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