急问：关于连接的问题

我初次上来。这段时间在做一个连接。但是老连不上。我用的是PCDNA3.1-myc-his,pEGFP-N1.酶切位点是EcoRI和XhoI。目的片断PCR也没有问题，是一条带。但是提质粒的时候只有一条带，是不是这样会影响酶切。那两个酶实验室有人用过，应该没有问题。而且质粒比较大，酶切后走电泳不太看的出变化。现在很困惑，请各位大大给点建议。