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连接又失败了,急

发布于 2004-09-30 · 浏览 2656 · IP 陕西陕西
这个帖子发布于 20 年零 221 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

本人由于要表达2kb的片断,用takara的Pyrobest酶P的产物,总是连不到载体中去。试过用Hind3和Bgl2分别双酶切PCR产物和载体后连接,前后用过3种载体,大小从2.9kb到5.5kb,都不行。又试过PCR产物加A尾后连接T载体(由于没有dATP,用dNTP代替之)。总之,每次转化后的板子上只有1-2个菌落,而阳性对照长得很多。提质粒酶切鉴定,全为空载体。已经连了3个月了,急煞我也。请各位高手支招。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2656

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