[求助]转化不成功

我用的是Invitrogen的TOPO T/A 克隆盒，作阳性对照质粒都转的很好，但是一与PCR产物连接后就转不成功。我的PCR产物是混合产物，想建库的。PCR后需要进行纯化和加尾，纯化前后电泳检测都是有条带的，连接反应在室温、16度、4度都试过，反应时间半小时、24h、48h也都试过，但是一直转不出来。加尾用的是普通Taq酶，72度1h，怕Taq酶会抑制连接反应，加完尾后又纯化了一遍，也是有带的，亮度要弱一些。
连接体系如下：
PCR products 4微升
TOPO vector 1微升
salt solution 1微升
请高手指教！万分谢谢！