[求助]偶的连接问题！
发布于 2004-09-15 · 浏览 1244 · IP 北京北京
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偶是用Eco RI 和Pst I 同时进行的双酶切，电泳后看结果还可以（当然由于酶切后和酶切前大小差不多，所以只能说带比较单一和清楚，至于酶切完全不完全不知道）。
然后用的NEB的QUICK LIGATION 进行连接，说明书上说室温（25度）5分钟即可，偶第一次没成功，后来加长了点连接时间，加到80分钟。但是今天看，还是不行！
感受态做了对照，有菌落，但是比较少，所以偶想再重新做感受态试试！
各位大虾还有其它什么建议？
然后用的NEB的QUICK LIGATION 进行连接，说明书上说室温（25度）5分钟即可，偶第一次没成功，后来加长了点连接时间，加到80分钟。但是今天看，还是不行！
感受态做了对照，有菌落，但是比较少，所以偶想再重新做感受态试试！
各位大虾还有其它什么建议？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1244
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