急切请教两个片段连接的问题!
我把目的基因已经克隆到pGEM-Teasy载体上,AseI和NheI双酶切,与同样双酶切的pGFP-C2载体相连接,酶切体系100ul,电泳凝胶回收,连接比例试过多种(载体和基因:1:1,1:3,1:10,3:1),感受态经测试是有效的,可是总是无任何菌落形成,有一次长了很多菌落,但挑了上百个也没有目的基因,经酶切鉴定可能是载体自连的,但我的载体肯定是酶切完全的(因为切和没切开的在电泳中能看出来。请问这是什么原因?
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2503