SalI单酶切、连接?
不知有没有哪位大侠做过SalI单酶切后的两个片断的连接?我的载体与片断的长度都是6kb多一点,这个连接我已经作了很长时间,但一直没有结果。我试过载体脱磷与未脱磷连接,也试过载体与片断的不同比例,但都没有出来阳性结果(仅得到过一个反向连接的质粒),其它单酶切的连接我也做过很多也都成功了,不知是不是SalI单酶切的连接很难?分子生物学我也做了好几年了,但从未碰到如此难连接的质粒,请有经验的给支支招。谢谢!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3422
不知有没有哪位大侠做过SalI单酶切后的两个片断的连接?我的载体与片断的长度都是6kb多一点,这个连接我已经作了很长时间,但一直没有结果。我试过载体脱磷与未脱磷连接,也试过载体与片断的不同比例,但都没有出来阳性结果(仅得到过一个反向连接的质粒),其它单酶切的连接我也做过很多也都成功了,不知是不是SalI单酶切的连接很难?分子生物学我也做了好几年了,但从未碰到如此难连接的质粒,请有经验的给支支招。谢谢!
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