【求助】载体构建 求助中~~~~
发布于 2008-10-17 · 浏览 4939 · IP 四川四川
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构建载体也是两个多月了,总连不上,挑出了的菌落pcr检测都是阴性
从头开始"两回了了,头发已经很短了,
酶切用的ECOR1 XHO1 .载体用的PET28\32
第一回以为是酶的问题,就把ECOR1 换成了5,结果还是没出来
目的片段 :载体的比例尝试过1:3 1:5 1:8 1:9 1:10, 全没有结果.
胶回收 质粒提取都用的OMIGA的试剂盒来做的,电泳鉴定过,没有问题
酶切后的回收一点问题都没有,实验室自制的感受态JM109
TA克隆效果很好,不应该是感受态的问题啊
我都要疯了,借这求助呀
在从头开始的话 我只 能变秃子了!!!!
变秃子不打紧 关键是 我已经研三了
从头开始"两回了了,头发已经很短了,
酶切用的ECOR1 XHO1 .载体用的PET28\32
第一回以为是酶的问题,就把ECOR1 换成了5,结果还是没出来
目的片段 :载体的比例尝试过1:3 1:5 1:8 1:9 1:10, 全没有结果.
胶回收 质粒提取都用的OMIGA的试剂盒来做的,电泳鉴定过,没有问题
酶切后的回收一点问题都没有,实验室自制的感受态JM109
TA克隆效果很好,不应该是感受态的问题啊
我都要疯了,借这求助呀
在从头开始的话 我只 能变秃子了!!!!
变秃子不打紧 关键是 我已经研三了
最后编辑于 2008-10-18 · 浏览 4939
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