【求助】sybr green ,taqman探针 检测miRNA无从选择 望高手指点!
Facile means for quantifying microRNA expression by real-time PCR. BioTechniques Vol. 39, No. 4 (2005)
Real-time quantification of microRNAs by stem–loop RT–PCR. Nucleic Acids Research, 2005, Vol. 33, No. 20 e179
第一篇用sybr green法。第二篇用Taqman探针法。
我两个方法的原理都看了,他们的实验结果似乎都很完美。
现在从经费方面考虑想用第一种方法。
问题是:成熟miRNA经逆转录后扩增的片段只有65个bp,sybr green本身对引物二聚体敏感,这么小的片段用sybr green合适么?
如果用第二种方法,我想茎环结构的RT引物自己设计,因为文献里面有相应的茎环结构,RT用常规的方法就可以了吧?不必买专门的miRNA 的RT试剂盒吧?价格差得太远了。
taqman探针也可以自己设计,我是不是只要交给公司标记就可以了,其它的试剂也可以单独买,不用试剂盒吧?
望高手指点!















































