紧急求助——有没有在做3’RACE的，请帮我分析一下！！

我最近在做3’RACE，用的是TAKARA的试剂盒，用生工的总RNA 抽提RNA，引物是参照已知的一段序列进行设计的，做PCR时（退火温度52度，我的引物长度是22）第一次出现的带比预期的要大点，而且带很特异，当时就去测序结果不是我要的只是序列的两段有我的引物，第二次换了引物，结果得到的带比目的带小，也很特异，没有杂带，可是测序依然不是我的基因是细胞色素b基因。第三次我用了第2次的引物，和第一次的引物作半巢氏PCR，结果奇怪的是竟然得到的和单独用引物2得到的序列一样还是细胞色素b基因，我都做了2个多月了，一直做不出，实在是郁闷啊，请各位大侠帮我分析一下到底是什么原因？（备注我用来阔增的引物，要阔增的片段有100bp左右的重叠。我是从用conA刺激24h的脾淋巴细胞中进行RNA抽提的）
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希望可以得到各位战友真诚的帮助，谢谢！！！