急急请教,5‘和3’RACE均无结果?
我做的是已知一段EST序列,要扩出全长。用的是clonthch公司的试剂盒。试剂盒所提供的阳性对照(运铁蛋白受体,3‘端大约长2.3kb,5' 端大约长2.9BP)都可扩出来,但实验标本都扩不出来。现用takara LATaq ,不知是片段太长还是GC含量太高。反应条件:94度5秒,72度2分,5个循环;94度5秒,70度10秒,72度2分;5个循环;94度5秒,68度10秒,72度2分;27个循环。总是没有条带出现。马上就要开题了可什么都没做出来。各位有什么好的建议、想法请告知。不胜感激!!!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2427