pfu高保真酶怎么那么难用？

前几天用普通的酶扩出了一条很漂亮的目的片断，现在要做割胶纯化转化，要用pfu高保真酶。我完全按它的说明书上操作。反应体系是这样的：buffer（含镁离子）5微升，上下游引物各2微升，dntp4微升，模板2微升，pfu高保真酶0.9微升,50微升体系。95度2分钟 95度50秒 54度 50秒 72度2分钟 35个循环，75度5分钟 跑电泳一看，只有几条很淡的非特异条带，请高手指点迷津。